在当下抗体药的竞争格局中,“谁能更快、更准、更稳定地找到高质量抗体克隆”,谁就能在激烈的创新药赛跑里抢到先机。而这场竞赛中最关键的一环,是杂交瘤抗体筛选 ——它不是一个普通的实验步骤,而是影响抗体药“能否继续往下走”的首道关卡。从小鼠免疫到杂交瘤融合,再到单克隆抗体筛选,每一步都牵动着研发团队的神经。而在这条“长跑”中,杂交瘤初筛往往是最耗时、最费力的一段旅程,长期被复杂流程、低通量、假阳性率高、亲和力难判定等问题所拖累。
抗体药开发困境:杂交瘤抗体筛选的"效率魔咒"
杂交瘤技术自1975年问世以来,已成为单克隆抗体制备的经典方法。然而,传统的杂交瘤抗体筛选过程复杂,需要经历多次亚克隆和ELISA检测,往往耗费数周甚至数月时间。尽管 ELISA 等固相法在行业使用多年,但它们逐渐暴露出不适配当今高速度、高通量抗体药开发的局限:
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操作复杂降低结果可重复性、耗时长、洗涤步骤易导致高背景或信号损失。
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固相吸附改变抗原构象,影响真实结合:固相吸附后抗原构象可能发生改变,可能导致非天然暴露表位、难以评估真实结合能力以及亲和力评价结果偏差,难以反映真实性。
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通量有限,难以适应动辄上千克隆的筛选需求:随着抗体库变大、靶点多样化、动物免疫策略升级,杂交瘤克隆数量成倍增长,而传统方法往往不足以支撑这一速度。
技术矛盾:“效率”与“准确性”必须同时满足
当前抗体药研发的趋势可以总结为三个关键词:
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时间敏感:项目越快推进,越能抓住窗口期
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资源宝贵:研发成本高,容错率低
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质量为王:抗体筛选必须精准可靠
过去,速度与准确性往往难以兼得——越是快速的筛选,越可能牺牲真实性;越是严格的检测,又可能速度太慢。
而 TR-FRET 技术,正是在这一矛盾点上给出了解决方案,它是近年来快速崛起的均相检测技术,被广泛用于抗体药开发、蛋白相互作用、高通量药物筛选等场景中。
这一技术的重要价值在于:
> 均相检测体系,无需分离洗涤步骤,大大简化实验流程
> 时间分辨消除自发背景信号
> 适配大规模筛选:96/384/1536孔板均可选,大幅压缩抗体筛选周期
> 信号强度可直接反映抗体结合能力:TR-FRET的最终信号通常以受体荧光与供体荧光的比值(如665nm/620nm)来表示,不受加样误差、荧光淬灭等因素的干扰。
杂交瘤筛选试剂盒(His-抗原)(TR-FRET)如何真正解决问题?

依托于TR-FRET技术平台,ACROBiosystems百普赛斯已成功开发出杂交瘤抗体筛选试剂盒(His-抗原)(TR-FRET)(Cat. No. FRT-P016),该试剂盒产品可在0.5-1小时内筛选出与His标签抗原结合的小鼠杂交瘤抗体,还可用于快速测定小鼠杂交瘤细胞上清液中抗体的亲和力。
检测原理
杂交瘤抗体筛选试剂盒基于TR-FRET技术,采用免疫夹心测定法检测小鼠杂交瘤细胞上清液与其His标签抗原的结合能力。将铕螯合物标记的单克隆小鼠IgG抗体作为能量供体(Donor),使用特定荧光素FA标记单克隆His标签抗体作为能量受体(Acceptor)。
☞ 当检测样本中含有目标抗体时,由于小鼠杂交瘤细胞上清液与其His标签目标抗原的结合,此时能量供体和能量受体非常接近,能量供体在特定光源激发下发出的620nm的信号,该信号被能量受体接收,发出665nm的信号。
☞ 当检测样本中不含有目标抗体时,供体与受体无法相互靠近,从而阻止荧光共振能量转移的发生。

杂交瘤抗体筛选试剂盒工作原理
为了确保 TR-FRET 杂交瘤筛选获得稳定、可信的结果,高质量的 His 标签抗原至关重要。依托于成熟的重组蛋白开发平台,ACRO可提供数千种具备高纯度、高活性及构象正确的His标签蛋白产品,覆盖自身免疫性疾病、代谢病、癌症等多种热门适应症靶点。
| TL1A | DLL3 | IL23A & IL12B |
| EGF R | BCMA | VEGF165 |
| IL-2 | IL-4 | CD3E & CD3D |
| Her2 | PD-L1 | Transferrin R |
📣 该试剂盒(FRT-016)设计了严谨的对照系统以保障结果的高度特异性和可靠性

In the graph, red represents the positive control samples, orange represents the negative control samples, and green represents the blank buffer controls (without Acceptor).
📣 该试剂盒(FRT-016)具有良好的动态响应范围和浓度依赖性,能够稳定反映抗原与抗体的真实结合水平

High-dose effect is a common phenomenon in TR-FRET assays. The optimal antigen concentration and antibody dilution must be determined empirically for each experimental setup.
📣 该试剂盒(FRT-016)具有优异的抗基质干扰能力

The sample demonstrates a clear dose-dependent response across different matrices.
📣 该试剂盒(FRT-016)具有出色的通用性,可广泛适用于小鼠多种IgG亚型的检测

This kit is not only suitable for detecting Mouse IgG1, but also for Mouse IgG2a and Mouse IgG2b.
📣ELISA与TR-FRET筛选结果的比较——在以下三个案例中,TR-FRET试剂盒对小鼠杂交瘤上清液的筛选结果均与传统ELISA方法一致。
案例1:

案例2:

案例3:

我们目前可提供多款现货TR-FRET试剂盒产品,覆盖多种适应症热门靶点,并支持专业定制,让您的实验真正做到“开箱即用、一步到位”!

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TR-FRET直播课回放

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